紫外可見分光光度計(jì)的外光路系統(tǒng)一般由光源、反射鏡或透鏡組成;光源一般都是由氘燈和鎢燈(鹵鎢燈)及其燈架組成;反射鏡一般用凹面反射鏡。有些儀器的外光路系統(tǒng)采用透鏡或柱面鏡。這些鏡子的作用是把光源發(fā)出的光成像在單的人射狹縫上?;蛘哒f,把光源發(fā)出的光,集中到單色器的入射狹縫上,并均勻照明單色器的入射狹縫。有時(shí)候也講,光源的燈絲和入射狹縫是物像關(guān)系。
紫外可見分光光度計(jì)的外光路大體上有以下幾種形式。
①氘燈和鎢燈位于凹面反射鏡的同側(cè),并固定不動(dòng)。光源切換是通過電機(jī)帶動(dòng)平面反射鏡振動(dòng)來實(shí)現(xiàn)的。
②氘燈和鎢燈位于凹面反射鏡的兩側(cè),氘燈和鎢燈固定不動(dòng),凹面反射鏡運(yùn)動(dòng)。光源切換是通過電機(jī)帶動(dòng)凹面反射鏡旋轉(zhuǎn)來實(shí)現(xiàn)的。
③氘燈和鎢燈固定在一個(gè)組座上,凹面反射鏡是固定的。光源切換是通過電機(jī)帶動(dòng)氘燈和鎢燈固定組座移動(dòng)來實(shí)現(xiàn)的。
④若采用氘鎢燈(氘燈和鎢燈作在一起),則氘鎢燈位于凹面鏡的左側(cè)或右側(cè),凹面鏡固定不動(dòng),光源通過凹面鏡成像在入射狹縫上。
(1)測(cè)量波長(zhǎng)
在定量分析中,為了提高測(cè)定的靈敏度,入射光的波長(zhǎng)應(yīng)選擇被測(cè)物的zui大吸收波長(zhǎng)λmax,如果λmax有干擾,可選擇另一條靈敏度稍低、但能避免干擾的譜線,所以,適當(dāng)選擇入射光的波長(zhǎng),不僅能提高測(cè)定的靈敏度,還能提高測(cè)定的準(zhǔn)確度。
(2)狹縫寬度
狹縫寬度過大,入射光的單色性差;狹縫寬度太小,入射光的強(qiáng)減弱。狹縫寬度過大或過小均會(huì)造成靈敏度降低,*選擇是產(chǎn)生zui小誤差情下的zui大狹縫。一般選用儀器的狹縫寬琶度應(yīng)小于待測(cè)樣品吸收帶的半寬度,否則測(cè)得的吸光度值會(huì)偏低,狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸光度不再;加為準(zhǔn),對(duì)于大部分被測(cè)品種,可以使用2nm縫寬。
(3)控制適當(dāng)?shù)奈舛确秶?/div>
可通過控制被測(cè)物濃度或改變吸收池厚度來實(shí)現(xiàn)吸光度合理的范圍,以盡量減小測(cè)量誤差。一般吸光度盡量控制在0.1-0.8范圍。
(4)空白溶液的選擇
空白溶液是用來調(diào)節(jié)吸光度測(cè)量工作零點(diǎn)即A=0,T=100%的溶液,以消除溶液中其它基體組分以及吸收池和溶劑對(duì)入射光的反射和吸收所帶來的誤差。根據(jù)情況不同,常用空白溶液有如下幾種選擇。
①溶劑空白 當(dāng)溶液中只有待測(cè)組分在測(cè)定波長(zhǎng)下有吸收,而其它組分無吸收時(shí),可用純?nèi)軇┳骺瞻住?/div>
②試劑空白 如果顯色劑或其它試劑有吸收,而待測(cè)試樣溶液無吸收,則用不加待測(cè)組分的其它試劑作空白。
③試樣空白 如果試樣基體有吸收,而顯色劑或其它試劑無吸收,則用不加顯色劑的試樣溶液作空白。